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更新时间：2025-12-19 
浏览次数：16NEB末端修饰酶
--末端磷酸化、去磷酸化、末端补平、末端加A尾
北京云肽生物科技代理美国进口NEB碱性磷酸酶、T4 DNA聚合酶、Klenow片段（DNA聚合酶I大片段）、快速末端平齐试剂盒、Taq DNA聚合酶等，用于DNA末端磷酸化、去磷酸化、末端补平/末端平齐化、未端加A尾等。NEB末端修饰酶提供丰富产品选择，经严格质控，性能稳定可信赖。
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一、末端磷酸化--T4 PNK
NEB T4 多聚核苷酸激酶(T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK，货号M0201)，支持对DNA、RNA进行5'末端磷酸化，以进行连接反应，并同时具有3'磷酸酶活性，可去除3磷酸基团，可用于对DNA、RNA进行末端标记，作为探针和进行DNA测序。
二、末端去磷酸化--碱性磷酸酶
1、NEB虾碱性磷酸酶(rSAP)
NEB虾破性磷酸酶(Shrimp Alkaline phosphatase，rSAP，货号M0371)，是一种不耐热的重组碱性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'未端和3末端去磷酸化。可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反应中的游离dNTP。NEB虾碱性磷酸酶可用于线性化质粒DNA去磷酸化防止自连、用于克隆或探针末端标记、制备DNA测序和SNP分析模板等。NEB虾碱性磷酸酶rSAP在65℃下加热5min可wan全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除，减少纯化步骤。
2、NEB热敏磷酸酶(AnP)
NEB热敏磷酸酶(Antarctic Phosphatase，AnP，货号M0289)，是不耐热的重组碱性磷酸酶，反应条件灵活，兼容各类限制性内切酶缓冲液，无需纯化，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反应中的游离dNTP。NEB热敏磷酸酶可用于防止线性载体自连、制备DNA测序和SNP分析模板。NEB热敏研酸酶AnP在80℃下加热2min可wan全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除，减少纯化步骤。
3、NEB快速CIP
NEB快速CIP(Quick CIP，货号M0525)，是热敏重组型小牛肠碱性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可在10min内完成5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端的去磷酸化，也可用于降解PCR反应中的dNTP。相比小牛肠碱性磷酸酶CIP，NEB快速CIP活性更高，所需酶量更少，降低每次反应的成本;无需锌等额外添加剂，并缩短温育时间;兼容各类限制性内切酶缓冲液，无需纯化;快速且不可逆的热失活特性，减少纯化步骤;重组酶具备更高纯度、更高批次间一致性、更高性价比。NEB快速CIP在80℃下加热2min可wan全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除。
重组虾碱性磷酸酶 M0371 | 热敏磷酸酶 M0289 | 快速CIP M0525 | |
100%热失活 | 5min/65°c | 2min/80°c | 2min/80°c |
高比活性 | • | • | |
改进稳定性 | • | • | |
直接用于NEBbuffers | • | • | • |
需额外添加 | •（Zn2+） | • | |
省时步骤 | • |
三、末端补平/末端平齐化
1、NEB T4 DNA 聚合酶
NEB T4 DNA 聚合酶(T4 DNAPolymerase、货号M0203)。具有5’→3’方向DNA合成功能，以及很强的3’→5’核酸外切酶活性，可进行缺口填充，切除3’突出末端或补平5'突出末端，形成平末端。NEB T4 DNA 聚合酶不具有5'→3'核酸外切酶活性。
2、NEB DNA聚合酶l大片段(Klenow片段)
NEB DNA 聚合酶I大片段(DNA Polymerase l,Large Fragment,Klenow片段，货号M0210)，是大肠杆菌(E.coli)DNA聚合酶l的蛋白水解产物，保留了聚合酶活性，以及3'→5'核酸外切酶活性，但不具有5’→3核酸外切酶活性。
3、NEB快速末端平齐化试剂盒
NEB快速末端平齐化试剂盒(Quick Blunting Kit，货号E1201)，可以将不匹配的DNA5’或3'突出末端转化为5"磷酸化的平末端，可在30min内完成限制性内切酶消化的DNA末端平齐化，以便与平末端DNA克隆载体连接。NEB快速末端平齐化试剂盒作为即用型预混液，可在室温下反应，适用于剪切的、雾化的、经限制性内切酶消化的DNA进行末端平齐化，以便与质粒、粘性质粒cosmid、F黏粒fosmid、BAC载体进行连接。
T4 DNA 聚合酶 M0203 | DNA聚合酶I大片段(Klenow片段)M0210 | 快速末端平齐化试剂盒E1201 | 绿豆核酸酶 M0250 | |
5’突出末端补平 | • | • | • | |
3’突出末端切割 | • | • | • | • |
5’突出末端切割 | • |
四、末端加A尾
1、NEB Klenow片段
NEB Klenow片段 (Klenow Fragment，货号M0212)，重组来源，保留了聚合酶活性、不具有5’→3"核酸外切酶活性，经突变(D355A、E357A)去除了3'→5'核酸外切酶活性，可用于向PCR产物的平末端添加A尾。
2、NEB Taq DNA 聚合酶
NEB Taq DNA 聚合酶(Taq DNA Polymerase)在PCR反应时，可在每条PCR扩增产物末端自动添加一个3"-A突出未端，直接用于T/A连接。NEB提供多种热启动Taq DNA聚合酶，满足各类实验需求。
Klenow片段，3'→5'exo- | Taq DNA 聚合酶 | |
反应温度 | 37°C | 75℃ |
热失活 | 75℃ 20min | 否 |
核苷酸辅因子 | dATP | dATP |
北京云肽生物科技代理的末端修饰酶
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